К теме сна не раз уже обращалась
Профессии и диабет
Как улучшить сон при сахарном диабете?
Сон снижает чувство боли
Если ночью решил пожрать
Циркадианная этиология сахарного диабета 2 типа
Джавид Н, Матвеенко А. В. Циркадианная этиология сахарного диабета 2 типа. Физиология (Bethesda). 2018;33 (2):138–150. doi: 10.1152 / physiol.00003.2018
Учитывая фундаментальное значение циркадианной системы в физиологии млекопитающих, циркадианная ритмичность пронизывает все уровни организации млекопитающих от поведения до гормональной секреции, регуляции температуры , а также молекулярной регуляции транскрипции и трансляции генов. Самодостаточные и клеточно-автономные циркадианные осцилляторы присутствуют в широком спектре периферических тканей/клеток, включая ткани, критически важные для метаболического контроля, такие как скелетные миоциты, гепатоциты, адипоциты и подтипы панкреатических островковых клеток.
Например, циркадные ритмы в производстве глюкозы в печени и окружающей гликемии зависят от активности супрахиазматического ядра (SCN)-опосредованного автономного контроля циркадных часов печени. SCN также регулирует захват периферических осцилляторов косвенно через модуляцию циклов голодания/кормления, что особенно заметно в клеточных типах, реагирующих на ежедневные проблемы с питанием (например, панкреатические островки и гепатоциты).
Роль циркадных часов скелетных мышц в гомеостазе глюкозы
Как в исследованиях in vitro, так и в исследованиях in vivo было четко продемонстрировано наличие прочных самоподдерживающихся и автономных циркадных осцилляторов в скелетных миоцитах (43, 104). Наиболее примечательно, что устойчивая циркадная ритмичность существует почти для каждого аспекта физиологии скелетных мышц, критически важного для правильной регуляции гомеостаза глюкозы. Это включает циркадианные изменения в выражении и транслокации транспортера глюкозы GLUT4 скелетной мышцы (30), поглощении и оксидации глюкозы (32, 73), низложении гликогена (73), митохондриальной оксидативной емкости (163), так же, как метаболизме протеина (17) и липида (78). Например, пик физиологической активности в поглощении и окислении глюкозы скелетными мышцами совпадает с началом активных/питательных циркадных циклов как в экспериментах на мышах, так и в экспериментах на людях, что согласуется с основной ролью циркадной системы для повышения метаболической гибкости (73, 163). Важно отметить, что циркадианные ритмы в функциях скелетных мышц (например, поглощение глюкозы) сохраняются в изолированных мышечных клетках in vitro, что позволяет предположить транскрипционный контроль эндогенным циркадианным часовым механизмом (32, 104). Кроме того, СД 2 типа связан с нарушениями циркадного контроля поглощения и окисления глюкозы мышцами , что приводит к нарушению циркадных часов как фактора , способствующего патофизиологии инсулинорезистентности скелетных мышц при сахарном диабете (5, 32, 82).
Роль циркадных часов печени в гомеостазе глюкозы
Печень является одним из главных органов, ответственных за циркадный контроль суточного гомеостаза глюкозы (106). В условиях голодания суточные колебания скорости выработки печеночной глюкозы диктуют циркадные колебания уровня гликемии в крови. Таким образом, абляция SCN (или печеночно-специфических) циркадианных часов отменяет циркадианные ритмы в концентрации глюкозы в крови и приводит к нарушению гомеостаза глюкозы (1, 58). Печень также вносит свой вклад в циркадианный контроль постпрандиального метаболизма глюкозы, поскольку циркадианные изменения скорости выработки глюкозы печенью также являются ключевыми детерминантами суточных циклов чувствительности к инсулину и переносимости пищи (6 , 22 , 130). Кроме того, были показаны, что ключевые метаболические и ферментативные детерминанты печеночной продукции глюкозы (т. е., тарифы глюконеогенеза, гликогенолиза, и хранения гликогена) все характерные циркадные изменения у людей и на разнообразных животных моделях ( 60 , 73 , 82 , 110 ).
На клеточном уровне гепатоциты демонстрируют отчетливые циркадианные колебания в транскрипции, трансляции и морфологических особенностях, таких как размер и объем клеток ( 3 , 89 , 100 , 146 , 166 ). В частности, гепатоциты проявляют суточные паттерны экспрессии метаболических генов, необходимых для регуляции поглощение и хранения глюкозы печенью (например, файлы glut2 и ГСК), производства глюкозы печенью (например, Pepck и Gcgr), а также клеточные процессы, участвующие в окисление и хранения липидов печени (например, Cpt1 и Lipin1) (67, 100).
Кроме того, печеночный протеом (как ядерный, так и цитоплазматический) также подвергается значительным суточным регуляциям, особенно в биологических процессах, участвующих в репарации ДНК, пролиферации, рибосомном биогенезе и внутриклеточном транспорте белка ( 166 ).
Таким образом синтез белков связан с чередованием сна и бодрствования.
Важно отметить, что циклы голодания-кормления, по-видимому, являются основными сигналами синхронизации, регулирующими многие суточные ритмы в функции печени и связанные с ними суточные колебания в печеночном транскриптоме и протеоме (3, 89, 152, 164). Таким образом, при оценке механизмов, ответственных за генерацию циркадных ритмов в печени, следует проводить различие между час-зависимыми и час-независимыми (т. е. управляемыми питанием) циркадными ритмами, оба из которых способствуют генерации суточных колебаний в печени.
Иммунопреципитация хроматина в сочетании с глубокими исследованиями секвенирования (ChIP-Seq) пролили некоторый свет на потенциальные молекулярные мишени и механизмы , направляющие тактовую транскрипционную регуляцию в гепатоцитах (62, 126). В частности, Рей и его коллеги (126) определили общегеномную карту, соответствующую более чем 2000 связывающим участкам BMAL1 в печени. Важно отметить, что наиболее заметные сайты связывания были обогащены для промоторных областей генов, регулирующих печеночную глюкозу (например, Glut2 и G6pc ) и липиды (например, Agpat6 и Dgat2) метаболизм, таким образом более добавочно включающие печеночные часы как ключевые посредники гомеостаза глюкозы (126). В соответствии с этим выводом, специфическое для печени удаление Bmal1 у мышей приводит к потере циркадианной регуляции генов, необходимых для регуляции метаболизма глюкозы в печени, таких как транспортер глюкозы Glut2, что приводит к дисрегуляции системной гликемии и толерантности к глюкозе (67). Совсем недавно Якоби и его коллеги (53) расширили эти данные, чтобы продемонстрировать, что печеночный Bmal1 координирует внутриклеточную митохондриальную динамику (деление и митофагию) и играет существенную роль в регуляции окислительной способности печени. Следовательно, специфическое для печени удаление Bmal1 рекапитулирует печеночную патологию при СД2, характеризующуюся повышенным окислительным стрессом, потерей инсулиновой сигнализации, эктопическим накоплением липидов и резистентностью печени к инсулину (53).
Печеночные часы также управляют регуляцией клеточного метаболизма через «непрямые» пути, опосредованные активацией транскрипционных факторов и других транскрипционных и трансляционных регуляторов ( 12 , 40 , 138 , 171 , 172 ). Исследования ChIP-Seq показывают «транскрипционную регуляцию» как наиболее обогащенный аннотированный функциональный кластер сайтов связывания BMAL1 в печени, который включает 82 фактора транскрипции ДНК и 18 печеночно-экспрессированных ядерных рецепторов ( 126 ). В частности, печеночные часы регулируют метаболизм липидов и холестерина через BMAL1:CLOCK-опосредованную трансактивацию Klf10 (Kruppel-подобный фактор транскрипции) и ядерный рецептор Ppara ( peroxisome proliferator-activated receptor α) (12, 40). Интересно, что Klf10 и Ppara также регулируют активацию промотора Bmal1, тем самым подчеркивая сложную взаимосвязь между циркадными часами и печеночным метаболизмом (12 , 40). Наконец, исследования также показывают, что циркадные репрессорные белки (например, CRY 1 и 2 и PER2) координируют циркадный контроль над метаболизмом глюкозы в печени через посттрансляционную регуляцию сигнальной функции цАМФ и функции ядерных рецепторов ( 138 , 171). Например, Чжан и др. (171) красноречиво продемонстрировано, что циркадная экспрессия CRY1 ингибирует активацию ключевых глюконеогенных ферментов через прямое связывание и ингибирование субъединицы GSA рецептора глюкагона печени, тогда как печеночная сверхэкспрессия Cry1 приводила к ослаблению глюконеогенеза и снижению гликемии у диабетических мышей. В целом, накопление данных подчеркивает печеночные часы как основные транскрипционные / трансляционные регуляторы производства глюкозы в печени, поглощения и чувствительности к инсулину, что подчеркивает их потенциал в качестве терапевтических мишеней в T2DM (160).
Роль циркадных часов адипоцитов в гомеостазе глюкозы
Белая жировая ткань (БЖТ) служит двойной цели в регулировке гомеостаза глюкозы через свою роль как магазин энергии и через свои разнообразные инкреторно-родственные функции. БЖТ являются центральными энергетическими хранилищами, содержащими триглицериды (тг), которые используются в процессе липолиза [т. е. расщепления тг на свободные жирные кислоты (FFAs) и глицерин]. Таким образом, правильная регуляция липолиза и его аналога, липогенеза, имеет решающее значение для поддержания нормального гомеостаза глюкозы, так как избыток циркулирующих Ффас способствуют эктопическому накоплению липидов и последующему развитию инсулинорезистентности в СД2 ( 145 ). Действительно, циркадианные изменения концентрации свободных жирных кислот в плазме крови уже давно описаны у людей ( 14), явление, недавно приписанное циркадианным изменениям в активации сигнального каскада инсулина жировой ткани ( 13).
В связи с устойчивыми суточными изменениями энергетических потребностей млекопитающих было показано, что процессы жировой ткани, включая липолиз, адипогенез и метаболическое воспаление , регулируются циркадными часами ( 142, 143, 169 ). Последовательно, индукция ожирения из-за чрезмерных уровней триглицеридов плазмы и свободных жирных кислот характерно наблюдается у тактовых и/или Bmal1 мутантных мышей ( 128 , 161 ). Кроме того, исследования, проведенные как у грызунов, так и у людей, выявили ритмически экспрессирующие гены, управляемые часами, в различных депо жировой ткани ( 77, 143, 175), раскрывая циркадные профили экспрессии для тысяч генов критических для правильной регулировки метаболизма адипоцита ( 175 ). Например, в одном исследовании было показано, что высвобождение FFAs и глицерина регулируется часами за счет транскрипционной регуляции двух ключевых ферментов стимулятора липолиза (например, Atgl и Hsl ) с помощью BMAL1 и часового гетеродимера ( 144 ). Кроме того, Bmal1-дефицитные мыши продемонстрировали более низкую способность адипоцитов синтезировать полиненасыщенные жирные кислоты за счет более низких уровней экспрессии двух ключевых генов, участвующих в удлинении и десатурации FFA, Elovl6 и Scd1, которые, как было показано, также транскрипционно контролируются Bmal1 (101 ).
Помимо того, что жировая ткань служит энергетическим депо, она считается одним из крупнейших эндокринных органов в организме благодаря своему неограниченному потенциалу роста и способности выделять различные гормоны и цитокины. Количество адипокинов, секретируемых адипоцитами при ожирении и сахарном диабете, расширилось и включает лептин, адипонектин, резистин, висфатин и оментин, в дополнение к воспалительным цитокинам, таким как TNF-α, IL-6 и MCP-1, среди других ( 83). Один из наиболее хорошо изученных источников провоспалительных цитокинов при ожирении-индуцированная инсулинорезистентность-происходит из макрофагов жировой ткани (атм) ( 51 , 79 ). Показано, что при сахарном диабете происходит переход от противовоспалительных макрофагов М2 к провоспалительным макрофагам М1, которые являются известными продуцентами провоспалительных цитокинов, таких как ФНО-α, ИЛ-6 и Ил-12 ( 79). Хотя роль циркадной системы в контроле воспаления жировой ткани хорошо не изучена, накопление данных свидетельствует о том, что возмущения в циркадных путях могут вызывать воспалительные реакции. Например, тучные циркадиан-нарушенные мыши показали увеличенную тучность связанную с увеличенной экспрессией ключевых маркеров воспаления жировой ткани как антиген макрофага-1 ( MAC1) и TNF-α в WAT (33 ). Кроме того, нарушенные часы ( мутант Per2) макрофаги продемонстрировали повышенную провоспалительную активацию в условиях ЛПС и повышенную поляризацию макрофагов М1 в WAT ( 169). Интересно, что эти данные были дополнительно рекапитулированы у тучных мышей с Per1 / 2-нарушенными миелоидными клетками, опосредованными через макрофагальную нисходящую регуляцию PPARy, ключевого тактового транскрипционного фактора, участвующего в поляризации макрофагов M2 ( 169 ). В целом, убедительные данные свидетельствуют о том, что существует множество аспектов биологии жировой ткани (например, чувствительность к инсулину, липолиз, липогенез, воспалительные пути и т. д.) контролируются циркадными часами, нарушение которых приводит к усилению ожирения, инсулинорезистентности и повышенной восприимчивости к развитию Т2ДМ.
Роль островковых циркадианных часов в гомеостазе глюкозы
В людях, циркадное изменение в толерантности глюкозы и еды длиной было узнано как отличительная черта гомеостаза глюкозы в качестве отличительного признака ( 14 , 69 , 130 ). Действительно, повышенная толерантность к глюкозе проявляется в начале активного циркадианного цикла и связана с большей инсулиновой секреторной реакцией на глюкозу и β-клеточные секретагоги ( 14 ). В поддержку этих ранних наблюдений классические исследования Бодена и его коллег использовали протокол 72-Н глюкозного зажима для демонстрации надежного кормления и независимых от гликемии циркадианных секреторных паттернов инсулина у людей ( 7). Кроме того, циркадные ритмы в стимулированной глюкозой секреции инсулина сохраняются in vitro в культивированных изолированных панкреатических островках человека (и грызунов), а также в очищенных популяциях β-клеток , что предполагает регуляторный надзор со стороны автономных от клеток циркадных часов ( 103, 105, 108 ). Хотя циркадная регуляция реакции глюкагона α-клетки очень более менее понята, исследования также показывают циркадные изменения в секретировании глюкагона внутри-Виво, в культивированных островках , и в очищенных α-клетках ин витро ( 85 , 129, 130 ).
Наличие и функционирование автономных от клеток циркадианных часов в панкреатических островках было исследовано и подтверждено несколькими группами, использующими метод отслеживания биолюминесценции островковых клеток in vitro с помощью конструкций слияния часового гена люциферазы (например, Per1: LUC и Per2 :LUC) ( 87 , 107 , 108 , 116 – 118 , 121 ). В совокупности эти исследования показывают, что островковые клетки 1) проявляют устойчивые автономные циркадианные ритмы в экспрессии часового Гена с отчетливым периодом ~24 ч, фазой и амплитудой циркадианных колебаний, и 2) SCN, по-видимому, захватывает фазу циркадианных часов в островках через модуляцию поведения питания ( 121 ). Было также показано, что функция островковых циркадианных часов нарушается при воздействии циркадианных нарушений, вызванных изменениями в фотопериоде и / или воздействием ожирением диет ( 117, 118). Наконец, совсем недавно Петренко и его коллеги использовали новую модель тройной репортерной мыши, чтобы показать наличие прочных автономных клеток циркадных осцилляторов в очищенных популяциях β-и α-клеток, которые особенно характеризовались различными фазами транскрипционных и функциональных колебаний ( 108 ).
На клеточном уровне островковые клеточные часы управляют циркадными колебаниями в транскриптоме сродни другим метаболически активным типам клеток ( т. е. печени и скелетной мышце) (103 , 108 , 122 ). Действительно, большая доля транскриптов в мышиных островках (до трети) демонстрирует статистически значимые циркадианные профили (103). Циркадный-выразил транскриптов в островки клеток, преимущественно обогащенные для биологических путей, регулирующих секрецию инсулина и его экзоцитоз (например, сетью взаимодействий, везикулярный транспорт и экзоцитоз), митохондрий, РП белка, переработки и транспортировки, а также протоколы допросов участвующих в регуляции клеток (например, репликации ДНК и ДНК повреждения и ремонта) (103, 108, 122). Важно отметить, что недавно было показано, что очищенные популяции подтипов островковых клеток отображают подмножество α-и β-клеточных специфических циркадных транскриптов с соответствующей пиковой экспрессией во время неактивного/голодающего или активного/питательного циркадного цикла, соответствующего пиковой секреции глюкагона и инсулина ( 108 ).
На молекулярном уровне, недавняя работа Perelis et al. (103) красноречиво продемонстрировал, что циркадный контроль секреции инсулина и транскрипционной регуляции островков осуществляется ритмическим связыванием ДНК часов:гетеродимер BMAL1 с ключевым фактором транскрипции островков, PDX-1, наряду с одновременным набором островковых клеточных усилителей. Следовательно, учитывая широко распространенное значение циркадианных часов для регуляции транскрипции островков и гормональной секреции, в настоящее время многие группы показали индукцию непереносимости глюкозы, гипергликемии и нарушения стимулированной глюкозой секреции инсулина в поджелудочной железе и мутантах β-клеточного гена clock ( 71 , 87 , 103 , 120 , 131 ). Кроме того, нарушение β-клеточных часов также нарушает реплицирующую способность β-клеток и способствует повреждению ДНК-индуцированному апоптозу, вероятно, связанному с повышенной внутриклеточной окислительной средой и индукцией ER-стресса ( 70, 120). Взятые вместе, островковые циркадианные часы, по — видимому, играют существенную роль в регуляции функции и оборота β-и α-клеток. Следовательно, нарушенные по часам островки рекапитулируют как функциональные, так и морфологические нарушения, связанные с недостаточностью островков в T2DM.
Все больше данных свидетельствует о том, что терапевтические стратегии, направленные на повышение циркадной функции часов, могут быть полезны для профилактики и лечения метаболических нарушений, таких как СД2. Во-первых, как указано в настоящем обзоре, автономные от клеток циркадианные часы управляют регуляцией физиологических функций, необходимых для поддержания нормального гомеостаза глюкозы (например, поглощение глюкозы скелетными мышцами, производство глюкозы печенью, липолиз жировой ткани и функция островковых клеток) ( 30 , 46 , 53 , 103 , 142). Соответственно, фенотипические характеристики многих мутантных генных часов мышей повторяют патофизиологию, обычно наблюдаемую у пациентов с СД2, такие как инсулинорезистентность, чрезмерная продукция глюкозы печенью, эктопическое накопление жира, нарушение секреции инсулина и потеря β-клеток( 30 , 46 , 53 , 103 , 120 , 142 ). Во-вторых, патогенез ожирения и СД2 как таковой связан с нарушениями циркадианной регуляции как на уровне центральных, так и периферических циркадианных осцилляторов ( 16 , 39 , 61 , 92 , 134). Таким образом, развитие ожирения и СД2 у человека подтверждается нарушенной циркадианной физиологией ( 5 , 54 , 69 , 82 , 86 , 125 , 150 ). Действительно, для тучных диабетических грызунов характерны нарушенные поведенческие и метаболические циркадные ритмы, связанные с подавлением ТРАНСАКТИВАЦИИ CLOCK-BMAL1 и нарушением функции циркадных осцилляторов в периферических тканях (например, печени, скелетных мышцах и островках) ( 48, 61, 118). Кроме того, было показано, что эктопическая экспрессия CLOCK и BMAL1 в чувствительных к инсулину тканях изменяет инсулинорезистентность в скелетных мышцах и печени , уменьшает липолиз в адипоцитах и улучшает толерантность к глюкозе в мышиных моделях СД2 ( 76 , 142, 173 ).
Первый циркадный терапевтический тест на антидиабетическую эффективность был проведен на мелатонине, гормоне, синтезируемом и секретируемом из эндокринных клеток в пинеальной железе ( 93). Циркадные продукция и секретирование мелатонина управляются через сразу нейрональные входные сигналы от SCN (94), и таким образом циркадное секретирование мелатонина было описано как гормональный выход центральных циркадных часов ( 109). Действительно, экзогенное введение мелатонина оказывает прямое воздействие на СКН и периферические циркадианные осцилляторы через вездесуще выраженные рецепторы мелатонина (38). Впоследствии, приуроченное добавление мелатонина эффективно в увеличении глобальных циркадных ритмов как в грызунах , так и в людях ( 15, 147 ). Важно отметить, что добавление мелатонина в организм грызунов доказало свою эффективность в снижении ожирения и ослаблении инсулинорезистентности как печеночных, так и скелетных мышц путем прямого усиления клеточного сигнального каскада инсулина ( 41, 96). Кроме того, было показано , что в изолированных островках СД2 активация мелатониновой сигнализации ослабляет индукцию окислительного и эндоплазматического стресса ретикулума и улучшает стимулированную глюкозой секрецию инсулина и выживаемость β-клеток ( 23, 159 ). Хотя некоторые начальные клинические исследования на людях сообщили о благотворном влиянии лечения мелатонином на гликемический контроль у пациентов с СД2, необходимы дополнительные хорошо контролируемые клинические испытания для выяснения потенциальной эффективности мелатонина для профилактики и лечения СД2 у людей ( 34 ).
В последние годы повышенное внимание уделяется разработке мелкомолекулярных химических усилителей циркадианной системы с целью увеличения физиологических выходов, регулируемых часами ( 20 , 165 ). Впоследствии был разработан ряд химических соединений, специально нацеленных на основной циркадианный генератор, с документально подтвержденной эффективностью в модуляции метаболической функции в доклинических исследованиях. В частности, нобилетин (естественно встречающийся флавоноид) был недавно идентифицирован как усилитель амплитуды часов, действия которого опосредованы активацией ядерного рецептора ROR (48). Важно отметить, что хроническое введение Нобилетина в двух различных моделях мышей с ожирением / СД2 приводило к восстановлению осцилляторных паттернов в циркадной и метаболической экспрессии генов в печени и соответствующему фенотипическому улучшению гликемии, толерантности к глюкозе, инсулинорезистентности и эктопического накопления жира ( 48 ). Был показаны, что модулирует другой недавно открытый химический модулятор/демодулятор циркадианной системы, агонист Rev-ERB-α / β, также экспрессию гена циркадного обмена улучшает гликемию, липидемию, и эктопическое накопление жира у мышей ( 149). Кроме того, Хирота и его коллеги идентифицировали небольшой активатор CRY молекулы (KL001), который препятствует деградации Cry, опосредованной убиквитином, что приводит к стабилизации CRY и удлинению периода циркадиана (49). Важно отметить, что введение KL001 было показано, что он ослабляет глюкагон-индуцированный глюконеогенный поток в изолированных гепатоцитах in vitro, а также улучшает непереносимость глюкозы у тучных инсулинорезистентных мышей in vivo ( 49, 52). Наконец, полезные метаболические эффекты, приписываемые химическим модуляторам Rev-ERB-α / β и CRY, не были связаны с повышенной циркадной амплитудой часов , что подчеркивает необходимость дополнительных исследований для полного понимания механизмов, лежащих в основе физиологических эффектов химических соединений, модифицирующих часы ( 49, 52 ).
Заключение
Циркадная физиология млекопитающих характеризуется исключительной стабильностью во временной регуляции многочисленных биологических функций, проявляющейся почти 24-часовым периодом временного разрешения с минимальным коэффициентом дисперсии (112). Однако физиологические преимущества циркадной системы уменьшаются, когда внешние экологические циклы отклоняются от нормы (например, 24 ч), что становится все более распространенным в современном обществе ( 80 ). Это приводит к состоянию, которое часто характеризуется как циркадианное рассогласование или нарушение (26, 59, 113), условие сильно связанное с метаболически дисфункцией и развитием тучности и СД2 ( 11 , 21 , 64 , 65 , 74 , 75 , 95 , 99 , 111 , 119 , 135 , 141 , 154 ). В настоящем обзоре представлены обширные клинические и доклинические данные, подтверждающие существенную роль циркадианной системы в регуляции метаболической функции и гомеостаза глюкозы. Эта работа также обеспечивает сильное обоснование для терапевтического таргетирования циркадианной системы в лечении и профилактике СД2 и последующих метаболических сопутствующих заболеваний. Необходимы дальнейшие исследования, направленные на выявление и характеристику механизмов действия новых химических и эндогенных модификаторов циркадной системы млекопитающих, обладающих потенциалом усиления регулируемых часами метаболических и глюкозочувствительных физиологических процессов.
Для того, чтобы знания, полученные Вами работали эффективно ими нужно делиться и за них нужно заплатить. Таковы законы жизни.На моём сайте нет рекламы, я не сотрудничаю с фармфирмами.Поэтому публикую номер счёта на который можно послать мне деньги.Если Вам пригодились и помогли мои знания, то можете перевести на этот счёт столько, сколько считаете нужным.Размещаю номер своей карты Сбербанка 2202200128714514
